Тест-система для кількісного аналізу та визначення авідності антитіл класу IgG DIA®-Rubella-IgG-av

Тест-система імуноферментна для кількісного аналізу та визначення авідності антитіл класу IgG до вірусу краснухи (Rubella Virus) DIA®-Rubella-IgG-av

Кількість досліджень - 96 (12х8)

ПРИЗНАЧЕННЯ

Тест-система призначена для кількісного визначення IgG до вірусу краснухи та їх авідності в сироватці або плазмі крові людини методом імуноферментного аналізу.

Аналіз може бути проведений як з використанням стандартного обладнання для ІФА, так і в автоматичних імуноферментних аналізаторах відкритого типу.

КЛІНІЧНІ ПРОЯВИ

Вірус краснухи (Rubella virus) відноситься до родини Togaviridae і є РНК-вмісним вірусом розміром 50-70 нм в діаметрі. Механізм передачі збудника повітряно-крапельний, що обумовлює швидке поширення захворювання особливо в дитячих колективах. Вірус викликає широко розповсюджене захворювання зі слабко вираженими симптомами, яке характеризується лихоманкою, лімфаденопатією, плямисто-вузликовим висипом. Інфекція може перебігати в безсимптомній формі, що ускладнює її клінічну діагностику. В дитячому віці це захворювання не становить загрози. При первинному інфікуванні в першому триместрі вагітності існує значний ризик серйозних пошкоджень плоду. Тому вагітні, що не мають IgG до вірусу краснухи, є сприйнятливими до інфекції та відносяться до групи ризику.

IgМ до вірусу краснухи з'являються зазвичай на 1-5 день після появи клінічних симптомів,  досягають максимального рівня через 7-10 діб і до 4-5 тижня зникають. В окремих випадках при імунодефіцитних станах організму вони можуть зберігатися до 1 року. При захворюванні на краснуху  специфічні IgG з'являються на 2-3 дні пізніше, ніж IgM, досягають максимуму через 4-5 тижнів і зберігаються на високому рівні протягом тривалого часу. Наявність в крові специфічних IgG до вірусу краснухи є ознакою минулої інфекції або проведеної вакцинації. Визначення індексу авідності специфічних IgG (міцність зв'язку специфічних антитіл з антигенними детермінантами вірусу) дозволяє диференціювати первинну інфекцію від захворювання, перенесеного в минулому. Низькоавідні IgG до вірусу краснухи з'являються на 5 день після появи висипу та циркулюють в організмі протягом 2 місяців. Згодом їх замінюють антитіла з високим індексом авідності, які є показником тривалої імунної відповіді. Наявність високоавідних IgG з високою ймовірністю дозволяє виключити недавнє первинне інфікування. При серодіагностиці краснухи зазвичай використовують метод імуноферментного аналізу, який дає можливість протягом короткого часу виявити в крові специфічні антитіла і визначити стадію захворювання. Даний метод використовують також для визначення рівня захисного гуморального імунітету проти краснухи після перенесеного захворювання і вакцинації.

  ПРИНЦИП АНАЛІЗУ

Принцип аналізу DIA^®-Rubella-IgG-av базується на методі твердофазного непрямого ІФА.

Для кількісного аналізу досліджувані зразки вносять в лунки планшета, сенсибілізовані антигенами вірусу краснухи, з якими зв’язуються присутні у зразку специфічні IgG, утворюючи комплекси антиген-антитіло. Імунні комплекси виявляють міченими пероксидазою моноклональними антитілами до IgG людини. Після відмивання незв’язаних компонентів в лунки додають розчин проявника. Пероксидазну реакцію зупиняють стоп-реагентом і вимірюють оптичну густину суміші у лунках при довжині хвилі 450/620 нм, яка пропорційна концентрації IgG до вірусу краснухи у зразках.

Концентрацію IgG до вірусу краснухи визначають в Міжнародних одиницях (МО/мл) за калібрувальною кривою, побудованою з використанням позитивних контролів, відкаліброваних відносно Міжнародного стандарту WHO International Standard Anti Rubella Immunoglobulin, Human, код NIBSC: RUBI-1-94.

Для визначення індексу авідності специфічних IgG досліджуваний зразок інкубують в двох паралельних лунках імуносорбента. Потім один зразок промивають в звичайному режимі, а інший обробляють диссоціюючим розчином (ДР), який руйнує комплекси антигенів з низькоавідними IgG. Зв’язані з антигенами вірусу антитіла виявляють пероксидазним кон’югатом. Індекс авідності розраховують як відношення оптичної густини, отриманої при виявленні специфічних IgG в присутності ДР, до оптичної густини, отриманої при аналізі даного зразка, не обробленого ДР.