Тест-система для кількісного аналізу та визначення авідності антитіл класу IgG до збудника DIA®-Toxo-IgG-av

Тест-система імуноферментна для кількісного аналізу та визначення авідності антитіл класу IgG до збудника токсоплазмозу людини (Toxoplasma gondii) DIA®-Toxo-IgG-av

Кількість досліджень - 96 (12х8)

ПРИЗНАЧЕННЯ

Тест-система призначена для кількісного визначення IgG до T.gondii та їх авідності в сироватці або плазмі крові людини методом імуноферментного аналізу.

Аналіз може бути проведений як з використанням стандартного обладнання для ІФА, так і в автоматичних імуноферментних аналізаторах відкритого типу.

 

КЛІНІЧНІ ПРОЯВИ

Токсоплазмоз – протозойне захворювання, збудником якого є облігатний внутрішньоклітинний паразит Toxoplasma gondii. Зараження токсоплазмою відбувається при вживанні в їжу недостатньо термічно оброблених м’ясопродуктів, уражених цистами токсоплазм. Можлива також передача токсоплазм при трансплантації органів інфікованих донорів, при внутрішньоутробному зараженні плоду від матері. Інфікування в першому триместрі вагітності призводить до завмирання та абортуванню плоду. В більшості випадків токсоплазмоз протікає безсимптомно, що ускладнює його клінічну діагностику. В теперішній час для серодіагностики токсоплазменної інфекції широко застосовують метод імуноферментного аналізу (ІФА).

Виявлення в крові IgM до T. gondi не завжди підтверджує гостру інфекцію. Специфічні IgM з’являються на 10-14 день після інфікування, досягають максимуму через місяць і звичайно зникають через 3 місяці, але в окремих випадках можуть персистувати більше двох років, що ускладнює визначення тривалості інфікування. При первинному інфікуванні IgG до T.gondii з’являються в крові на тиждень пізніше за IgМ, через 1-2 місяці сягають максимального рівня та зберігаються протягом всього життя, при рецидивах захворювання їх рівень різко підвищується.

Показник індексу авідності специфічних IgG (міцність зв’язку специфічних антитіл з антигенними детермінантами T.gondii) є додатковим параметром для визначення терміну первинного інфікування. Він дозволяє підтвердити діагноз гострого токсоплазмозу та диференціювати первинну інфекцію від хронічної та перенесеної в минулому. Тест на визначення індексу авідності специфічних IgG входить до обов’язкового алгоритму обстеження вагітних жінок при підозрі токсоплазмозу. Індекс авідності специфічних IgG в перші 2-3 місяці захворювання підвищується і потім лишається стабільним.

 

ПРИНЦИП АНАЛІЗУ

Принцип аналізу DIA^®-Toxo-IgG-аv базується на методі твердофазного непрямого ІФА.

Досліджувані зразки вносять в лунки планшета, сенсибілізовані антигенами T.gondii, з якими зв’язуються присутні у зразку специфічні IgG, утворюючи комплекси антиген-антитіло. Імунні комплекси виявляють міченими пероксидазою моноклональними антитілами до IgG людини. Після відмивання незв’язаних компонентів в лунки додають розчин проявника. Пероксидазну реакцію зупиняють стоп-реагентом і вимірюють оптичну густину суміші у лунках при довжині хвилі 450/620 нм, яка пропорційна концентрації IgG до T. gondii у зразках.

Концентрацію IgG до T. gondii визначають в Міжнародних одиницях (МО/мл) за калібрувальною кривою, побудованою з використанням позитивних контролів, відкаліброваних відносно Міжнародного стандарту WHO International Standard Anti-Toxoplasma Serum Ig, код NIBSC: TOXM.

Для визначення індексу авідності специфічних IgG досліджуваний зразок інкубують в двох паралельних лунках імуносорбенту. Потім один зразок промивають в звичайному режимі, а інший обробляють диссоциюючим розчином (ДР), який руйнує комплекси антигенів з низькоавідними IgG. Антитіла, що залишились зв’язаними з антигеном T.gondii, виявляють пероксидазним кон`югатом.

Індекс авідності розраховують як відношення оптичної густини, отриманої при виявленні специфічних IgG в присутності ДР, до оптичної густини, отриманої при аналізі даного зразка, не обробленого ДР.